После этого двухкамерная система была стерилизована гамма-излучением (13 часов, 25 кГр). Культуральная среда на основе азид-декстрозного бульона была введена в нижнюю камеру таким образом, чтобы область перфорации контактировала с раствором; затем была проведена повторная стерилизация гамма-излучением.
Бактерии (Enterococcus faecalis (E)) были получены из института Пастера, Тегеран, Иран. Предварительно было проведено культивирование бактерий на специфичной среде с целью обеспечения культуральной чистоты. Чистые колонии бактерий были получены на кровяном агаре и перенесены на 10 см3 ТСБ, затем инкубированы при 37˚C в течение 24 часов; таким образом, была достигнута концентрация, составляющая 0,5 от концентрации раствора МакФарланда (1,5×108 бактерий/мл). С помощью стерильного шприца 0,1 мл бактериальной культуры вводили в пульпарную камеру зуба каждые 48 часов, и затем образцы инкубировали при 37°C. Исследование образцов проводили в течение 35 дней; в течение этого периода зубы оставались в инкубаторе и проводилась их ежедневная проверка. Помутнение среды культивирования указывало на бактериальное микроподтекание. В конце эксперимента среду с желчью и эскулином смешивали с 6,5 % раствором NaCl для оценки толерантности с целью подтверждения бактериальной инфильтрации в случае помутнения культуральной среды. Оценки проводил исследователь, не знавший о типе используемого материала для герметизации. Анализ данных осуществляли с помощью программного обеспечения SPSS (версия 19) с использованием критерия хи-квадрат.
Результаты
В таблице 1 представлены данные о бактериальном микроподтекании в экспериментальных группах. В группе Endoseal MTA в течение 35 дней не обнаружено бактериального микроподтекания. В группе Pro-Root MTA для 3 (17 %) образцов зарегистрировано бактериальное микроподтекание: в 2 случаях – через 10 дней и в 1 случае – через 12 дней после начала эксперимента. Однако при применении критерия хи-квадрат достоверного различия между двумя экспериментальными группами выявлено не было (p> 0,05). Бактериальное микроподтекание было отмечено для всех зубов положительного контроля через 24 часа после начала эксперимента. Бактериальное микроподтекание не было отмечено ни для одного из зубов отрицательного контроля (рис. 3). Результаты оценки толерантности с использованием среды с желчью и эскулином и 6,5 % раствором NaCl, а также окрашивание по Граму также подтвердили микроподтекание E. faecalis в культуральную среду, в которой отмечалось помутнение.
Обсуждение
Для пломбирования перфораций корня зуба использовались различные материалы.Минерал триоксид агрегат (МТА) является наиболее широко используемым материалом для устранения перфораций корня.15 Однако его применение в этом случае сопряжено с определенными техническими сложностями. Материал Endoseal MTA поставляется в герметичных шприцах и вводится в систему корневого канала. Он является самополимеризующимся и постепенно затвердевает на воздухе, поглощая влагу из окружающей среды и не нуждаясь в смешивании. В соответствии с информацией, предоставленой производителем, этот цемент на основе силиката кальция может рассматриваться как материал на основе MTA, поскольку его химический состав напоминает таковой у МТА. Таким образом, ожидается, что он будет иметь благоприятные физические и биологические свойства, сходные с таковыми у других материалов на основе МТА, описанных в предыдущих исследованиях. Кроме того, такой инъецируемый самополимеризующийся силер для корневых каналов удобен в использовании, что является его клиническим преимуществом.
В соответствии с информацией, предоставленной производителем, этот силер может использоваться для пломбирования перфораций корня зуба. Поэтому в данном исследовании авторами проведено сравнение герметизирующих свойств этого материала с таковыми у Pro-Root MTA; последний материал считается наиболее широко используемым для пломбирования перфораций. Бактериальное микроподтекание является причиной большинства эндодонтических воспалительных процессов, поэтому в данном исследовании была проведена проба на микроподтекание с помощью бактериальной инфильтрации. В исследовании в качестве контрольного микроорганизма использован Enterococcus faecalis, поскольку считается, что он играет важную роль в этиологии персистирующих перирадикулярных очагов.
Следует отметить, что проба на бактериальное микроподтекание, несмотря на большее сходство с клиническими условиями по сравнению с другими методами (например, пробой с проникновением красителя), характеризуется ограничениями при оценке герметизирующей способности материалов, обладающих антибактериальными свойствами, таких, как Pro-Root MTA и Endoseal MTA, использованных в данном исследовании.
В исследовании проведена оценка микроподтекания за период в 35 дней; в других исследованиях использовался период в 30 дней или более.6,21,22 Результаты данного исследования продемонстрировали, что ни для одного из зубов, запломбированных с использованием Endoseal MTA, бактериальное микроподтекание не наблюдалось. При этом для 17 % зубов, запломбированных с использованием Pro-Root MTA, отмечено бактериальное микроподтекание. Критерий хи-квадрат не выявил достоверных различий между двумя группами в отношении бактериального микроподтекания.
Khatib MS и соавт. сравнили герметизирующие свойства Endocem MTA и Endoseal MTA при устранении бифуркационных перфораций используя метод проникновения красителя и продемонстрировали, что Endoseal MTA характеризовался достоверно меньшими герметизирующими свойствами, чем Endocem MTA. В данном исследовании Endoseal MTA продемонстрировал высокие герметизирующие свойства; различие между данным исследованием и исследованием Khatib MS может быть связано с типом пробы на микроподтекание, а также с расположением перфорации, поскольку стойкость пломбировочных материалов к вымыванию и смещению при перфорации в области бифуркации и в области корня различаются; эта проблема приобретает еще большее значение в области бифуркации в связи с ее близостью к зонам приложения давления и потоку жидкости. Это объяснение поддерживается исследованием Adl в котором показано, что EndoSeal MTA характеризовался достоверно меньшей стойкостью сцепления, чем ProRoot MTA и Biodentine.
De Dues и соавт.25 провели оценку 36 бифуркационных перфораций в течение 50 дней и не обнаружили статистически достоверных различий между зубами, запломбированными с использованием портландцемента, и зубами, запломбированными с использованием МТА, при применении методики фильтрации бактериальной взвеси. В цитируемом исследовании 50 % образцов с MTA и 60 % образцов с портландцементом характеризовались микроподтеканием. МТА, использованный в данном исследовании, представлял собой материал Pro-Root MTA. Несмотря на различие в расположении перфорации в данном исследовании и в исследовании De Dues и соавт, количество образцов было сходным; тем не менее, отмечено большее количество случаев бактериального микроподтекания, чем в данном исследовании. Различие в длительности обоих исследований, вероятно, может объяснить различие результатов. Применение Pro-Root MTA чувствительно к методике, успех лечения сильно зависит от навыков и опыта оператора. Это может объяснить различие между результатами обоих исследований.
Ji Hee Hwang провели сравнение бактериального микроподтекания при использовании Endoseal MTA, Gutta-Flow и AH Plus при обтурации корневых каналов 60 премоляров с помощью лазерной сканирующей микроскопии и отметили, что Endoseal MTA характеризовался достоверно более высокими герметизирующими свойствами по сравнению с двумя другими группами. Несмотря на то, что указанными авторами использован другой метод оценки бактериального микроподтекания, полученные ими результаты подтвердили превосходство Endoseal MTA. Отсутствие микроподтекания в группе, где был использован Endoseal MTA, подтвердило результаты данного исследования. Нужно отметить, что в исследовании указанных авторов зубы, использованные в модели, отличались от зубов, использованных в данном исследовании.
Исходно предполагалось, что меньшее бактериальное микроподтекание будет иметь место в группе Pro-Root MTA по сравнению с группой Endoseal MTA; однако результаты показали обратное. Бактериальное микроподтекание было отмечено для всех зубов группы положительного контроля и не было отмечено ни для одного зуба группы отрицательного контроля, что подтверждает правильность методики. С другой стороны, временной интервал между появлением бактериального микроподтекания в группе положительного контроля и в группе Pro-Root MTA (два образца) указывал на значимый эффект Pro-Root.
Применение Pro-Root MTA намного сложнее применения Endoseal MTA, поскольку первый материал требует дополнительных этапов подготовки. Таким образом, опыт и навыки оператора могут значительно повлиять на успех лечения с использованием Pro-Root MTA. Это может объяснить более высокую частоту бактериального микроподтекания в группе Pro-Root MTA.
При большей длительности исследования могли бы быть получены отличающиеся результаты. Таким образом, необходимы дальнейшие, более продолжительные исследования для получения более надежных результатов. Представленные авторами результаты лишь указали на наличие или отсутствие бактериального микроподтекания, но не дали его количественную оценку. Рекомендуется проведение дополнительных исследований для оценки величины микроподтекания через различные временные интервалы с целью получения более точных результатов. Исследование было проведено исключительно на клыках, в последующих исследованиях необходима оценка и других групп зубов. Данное исследование было направлено исключительно на наличие перфорации. Таким образом, размер перфорации был стандартизирован для всех зубов. Эффективность Pro-Root MTA и Endoseal MTA для пломбирования перфораций различных размеров также подлежит дальнейшему изучению.
Заключение
С учетом ограничений данного исследования, его результаты показали отсутствие достоверных различий бактериального микроподтекания между Pro-Root MTA и Endoseal MTA при устранении перфорации корня зуба. Следует отметить, что Endoseal MTA характеризовался более простым применением и меньшей чувствительностью к методике нанесения при пломбировании перфорации, что может повлиять на успех лечения. Для дополнительного освещения этой проблемы необходимы дополнительные исследования.
Благодарности
Авторы хотели бы поблагодарить Исследовательский центр Медицинского университета Армии Исламской Республики Иран (Тегеран, Иран).
Данное исследование проведено на средства стоматологического факультета Медицинского университета Армии Исламской Республики Иран (Тегеран, Иран).
Конфликт интересов
Конфликты интересов отсутствуют.